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海洋研究所 [2]
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专利 [2]
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2011 [1]
2009 [1]
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一种海蜇基因组DNA的提取方法-1
专利
专利类型: 发明, 专利号: CN201010166122.X, 申请日期: 2011-03-23, 公开日期: 2011-03-23
崔朝霞
;
张姝
;
栾维莎
;
刘媛
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提交时间:2014/08/04
一种海蜇基因组DNA提取方法
2)将保存的蝶状体样品放入离心管中并直接加入buffer300~400ul匀浆
3)将步骤2)中消化后的溶液取出加入6M?NaCl
其特征在于:1)将海蜇有性世代的海蜇碟状体置入体积浓度为95%的酒精中脱水并保存
30~40ul质量浓度为10%的SDS
振荡浑匀20~30S
3~5ul浓度为20mg/ml的蛋白酶K
10000~12000rpm离心20?30分钟
封口后55~56℃消化0.8~1.0小时
吸上清
待用
而后加入上清液的0.7~1倍体积的异丙醇
?20~?18℃沉淀10~15分钟
沉淀后取出
以10000~12000rpm离心15?20分钟
弃去液体
并用体积浓度为70%的乙醇
离心洗1~2次
自然室温凉干
即得到海蜇碟状体的DNA。
一种海蜇基因组DNA的提取方法
专利
专利类型: 发明, 专利号: CN200710015295.X, 申请日期: 2009-01-14, 公开日期: 2009-01-14
崔朝霞
;
张姝
;
栾维莎
;
刘媛
收藏
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浏览/下载:77/0
  |  
提交时间:2014/08/04
1.一种海蛰基因组DNA提取方法
2)将步骤1)得到的原料内加入3~5ul浓度为20mg/ml的蛋白酶K
3)在步骤2)澄清溶液中加入与其等体积的苯酚
而后向上清液中加入上清液的0.7~1倍体积的异丙醇
其中苯酚
其特征在于:1)将海蜇无性世代的海蛰螅状体用手术剪刀剪碎至无明显颗粒状组织
在55~56℃消化24~26小时至溶液澄清
氯仿和异戊醇的混合溶液混匀
-20~-18℃沉淀10~15分钟
氯仿和异戊醇按体积份数比为25∶24∶1
加入CTAB buffer300~400ul
待用
离心
沉淀后取出
氯仿和异戊醇按体积份数比为24∶1。
待用
吸上清
离心
再加入与上清液等体积的氯仿和异戊醇混合液混匀
弃去液体
离心
并用体积浓度为70%的乙醇
吸上清
离心洗1~2次
将多余液体倒去室温自然凉干
即得到海蛰螅状体的基因组DNA
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