| 题名 | 中国北方海区部分单胞藻的分离、培养及基因条码研究 |
| 作者 | 徐娜 |
| 学位类别 | 博士 |
| 答辩日期 | 2012-05-20 |
| 授予单位 | 中国科学院研究生院 |
| 导师 | 逄少军 |
| 关键词 | 单胞藻 分离 分子鉴定 生长 |
| 学位专业 | 海洋生物学 |
| 中文摘要 | 中国海域宽广，海水中单细胞藻种资源极其丰富，然而搜集得到活体纯培养的藻种却非常少。从海水中分离新的单胞藻，获得活体种质，是开展实验研究和开发利用的基础，同时对保护海洋生物资源也具有重要意义。作者从中国北黄海海水中搜集、分离得到了51株单胞藻，探索了一条较为高效的分离纯化方法，用分子系统分析结合形态特点对浮游单胞藻做了初步的鉴定，并对其中的几种赤潮藻做了详细的分子鉴定及培养条件研究，对它们生长条件的研究有助于解释其在自然界大规模暴发的机制。在青岛沿海分离到一株罕见海水裸藻，依据18S rDNA和16S rDNA序列的系统分析结合形态特点将其鉴定为Eutreptiella gymnastica，为该藻在中国的首次正式详细记录。以广泛使用的光密度值OD680作为衡量藻体生物量变化的指标，研究了这株藻在不同温度、光照、盐度、氮磷浓度下的生长情况，结果表明它的最适生长条件为：温度20°C, 光照强度160μmol/(m2s)；它可耐受10～31的盐度范围，淡水中无法存活；磷营养是影响其生长的关键元素，PO43-浓度高于72μmol/L时大大促进藻的生长。 2011年5月山东荣成桑沟湾近海海域暴发赤潮，其规模在桑沟湾历史上罕见，较严重地影响了该海域水产动物的人工养殖。作者对赤潮暴发过程中海水里的一株优势种进行了18S rDNA和ITS序列的分析，将其鉴定为卡罗藻Karlodinium veneficum (=K. micrum)，是一种常见有害赤潮藻，在南方海区曾引发赤潮，在桑沟湾暴发是第一次记录，经分析其种源有可能来自南方。对两株赤潮藻和一株赤潮藻疑似种的18S rDNA和ITS序列分析结果显示这三株藻分别为锥状斯氏藻（Scrippsiella trochoidea）、赤潮异弯藻（Heterosigma akashiwo）和共生甲藻（Symbiodinium sp.）。研究了它们在不同培养条件下的生长，结果表明，在批次培养中，共生甲藻、锥状斯氏藻、赤潮异弯藻的生物量都在22℃达到最大，分别为每毫升细胞数9.28×105、7.9×104、4.75×105；强光和长时间光照促进生长，但锥状斯氏藻在强光下更早进入衰退期；三种藻都表现出较强耐受盐度变化的能力，在盐度为15～36的培养液中生长良好；营养实验表明，使用882μmol/L的NO3-和36μmol/L的PO43-能够维持三种藻的快速生长。用一对18S rDNA通用引物和一对rbcL通用引物对分离得到的其它单胞藻进行了扩增和分析，结果表明只有部分藻种的18S rDNA能够成功扩增（1720bp左右），rbcL通用引物（扩增rbcL中间部分序列，730bp左右）的扩增成功率较高。由于GenBank中可比对的可靠序列较少，因此根据目前的分子序列分析，仅对少量分离得到的藻种鉴定到种水平，部分到属水平。目前已鉴定的一些藻种包括：布氏双尾藻、中肋骨条藻、茧形藻、海链藻、圆筛藻、角管藻、角毛藻、加拉星平藻、曲舟藻、红胞藻、楔形藻、齿状藻等。 |
| 语种 | 中文 |
| 公开日期 | 2014-08-08 |
| 内容类型 | 学位论文 |
| 源URL | [http://ir.qdio.ac.cn/handle/337002/17770]  |
| 专题 | 海洋研究所_实验海洋生物学重点实验室 |
| 推荐引用方式 GB/T 7714 | 徐娜. 中国北方海区部分单胞藻的分离、培养及基因条码研究[D]. 中国科学院研究生院. 2012. |
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