有机磷农药降解酶基因Oph2的克隆及甲基对硫磷降解效果研究

doi:10.19812/j.cnki.jfsq11-5956/ts.2022.17.022

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	有机磷农药降解酶基因Oph2的克隆及甲基对硫磷降解效果研究
	尚立成 1,2; 水清照 1,3; 李玲 2; 寇宗红 4,5; 刘兰霞 4
刊名	食品安全质量检测学报
	2022-09-15
卷号	13 期号:17 页码:5688-5694
关键词	有机磷农药降解酶基因克隆表达载体降解能力甲基对硫磷
DOI	10.19812/j.cnki.jfsq11-5956/ts.2022.17.022
英文摘要	目的挖掘可高效表达有机磷农药降解酶的基因,并构建含有该表达基因的工程菌,提供一种高效降解甲基对硫磷的新方法。方法利用基因克隆获得高效表达有机磷农药降解酶基因Oph2,采用基因工程手段将其转化至毕赤酵母(Pichia pastoris)表达系统,对毕赤酵母的发酵产物进行十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳(sodiumdodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis,SDS-PAGE)定性和酶活定量研究,通过与目标底物甲基对硫磷反应,分析工程菌表达降解酶对甲基对硫磷的降解效果。结果本研究成功克隆得到了高效表达有机磷农药降解酶基因Oph2,基因全长1000 bp,编码256个氨基酸,酶蛋白分子量为37 kD,并利用表达载体pPIC9K成功将其转化至毕赤酵母GS115。构建的工程菌GS115-pPIC9K-Oph2表达有机磷农药降解酶活性为11.57 U/mL,对6.8 mg/L的甲基对硫磷降解效率为90%以上。结论本研究得到的工程菌GS115-pPIC9K-Oph2可高效表达有机磷农药降解酶,该酶活性高,对甲基对硫磷降解能力强,可有效应用于甲基对硫磷的降解。
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语种	中文
内容类型	期刊论文
源URL	[http://ir.lut.edu.cn/handle/2XXMBERH/159560]
专题	兰州理工大学
作者单位	1.甘肃省兰州新区疾病预防控制中心; 2.甘肃省白银市疾病预防控制中心; 3.兰州理工大学生命科学院; 4.甘肃省白银市食品检测检验中心; 5.甘肃农业大学食品科学与工程学院
推荐引用方式 GB/T 7714	尚立成,水清照,李玲,等. 有机磷农药降解酶基因Oph2的克隆及甲基对硫磷降解效果研究[J]. 食品安全质量检测学报,2022,13(17):5688-5694.
APA	尚立成,水清照,李玲,寇宗红,&刘兰霞.(2022).有机磷农药降解酶基因Oph2的克隆及甲基对硫磷降解效果研究.食品安全质量检测学报,13(17),5688-5694.
MLA	尚立成,et al."有机磷农药降解酶基因Oph2的克隆及甲基对硫磷降解效果研究".食品安全质量检测学报 13.17(2022):5688-5694.