题名 | 牙鲆补体分子 C3 及大菱鲆 CD55 的功能与应用研究 |
作者 | 吴蒙 |
答辩日期 | 2022-05-18 |
文献子类 | 硕士 |
授予单位 | 中国科学院大学 |
授予地点 | 中国科学院海洋研究所 |
导师 | 孙黎 |
关键词 | 牙鲆 大菱鲆 补体分子 C3 CD55 病原感染 |
学位名称 | 工程硕士 |
英文摘要 | 牙鲆(Paralichthys olivaceus)和大菱鲆(Scophthalmus maximus)是我国主 要的海水养殖鱼类,具有重要的经济价值。补体系统是免疫系统抵抗微生物病原 的第一道防线,在抗感染免疫中发挥重要作用。开展牙鲆和大菱鲆补体相关分子 的研究,有利于开发绿色安全的病害防治手段,促进水产养殖业的健康发展。 补体因子 C3 是补体系统的中心成分,在补体激活、免疫防御和免疫调节过 程中发挥着不可缺少的作用。补体系统可以通过 3 条途径激活,进而发挥清除病 原体的作用。C3 的活化是所有补体激活途径中最关键的一步,C3 经 C3 转化酶 切割形成 C3a 和 C3b,进一步激活补体后续通路。补体系统的激活受到系列调节 因子的调控。C3b 发挥功能后可以在补体调控因子的作用下降解为 iC3b,iC3b 进 一步降解为 C3c 和 C3d,从而将补体从激活状态恢复至静默状态。CD55 分子是 一种补体调节蛋白,通过加速 C3 转化酶的衰变解离来阻止补体系统的异常激活。 本论文研究了牙鲆 C3(PoC3)以及其激活片段 C3a(PoC3a)与 C3dg(PoC3dg) 和大菱鲆 CD55(SmCD55)的生物学功能。 PoC3 由 1655 个氨基酸残基构成,序列中包含 C3 家族高度保守的 GCGEQ 序列。PoC3 在牙鲆 9 种不同的组织中均有表达,并且病原体的感染会显著上调 PoC3 的表达水平。血清中的 PoC3 可以结合多种细菌,纯化的天然 PoC3 可以直 接杀伤哈维氏弧菌和海豚链球菌。敲降了 PoC3 的牙鲆的血清的杀菌活性显著降 低,并且加重迟缓爱德华氏菌在牙鲆中的感染。重组表达的 PoC3a(rPoC3a)可 以结合多种细菌和牙鲆外周血淋巴细胞(PBL)并可以诱导 PBL 发生趋化反应。 rPoC3a 可以提高牙鲆抗感染的能力。重组的 PoC3dg(rPoC3dg)可以与多种细 菌和 PBL 结合。 SmCD55 在大菱鲆 9 种不同的组织中均有表达。利用重组的 SmCD55 (rSmCD55)处理大菱鲆血清,可以显著抑制血清的溶血活性和杀菌活性,说明 rSmCD55 能够抑制补体激活。另外,rSmCD55 还可以结合多种细菌。综上所述, 这些结果表明 PoC3 是牙鲆补体系统激活的关键成分,其激活片段 PoC3a 和 PoC3dg 在抗感染免疫过程中发挥着重要作用,而 SmCD55 是大菱鲆重要的补体调节蛋白。 |
语种 | 中文 |
目次 |
第2章 牙鲆重要补体因子C3在补体系统中的功能探究... 9 2.1.5 牙鲆各组织在正常生理条件下PoC3的表达... 14 2.1.6 在病原菌感染条件下牙鲆各组织中PoC3的表达... 16 2.1.7 通过天然纯化方式获取PoC3蛋白与其特异性抗体的制备... 17 2.1.8 检测血清中PoC3蛋白是否可以结合细菌... 18 2.1.10 利用RNA干扰(RNAi)的方式探究PoC3的功能... 19 2.2.3 在病原菌感染条件下牙鲆各组织中PoC3的表达... 26 第3章 牙鲆C3激活片段C3a和C3dg的功能研究... 35 3.1.3 PoC3a重组蛋白(rPoC3a)原核表达载体的构建... 35 3.1.6 rPoC3a与PBL细胞之间的相互作用... 40 3.1.8 PoC3dg重组蛋白(rPoC3dg)原核表达载体的构建... 43 3.1.10 重组蛋白rPoC3dg与细菌的相互作用... 44 3.1.11 免疫荧光法检测rPoC3dg与PBL细胞的结合... 45 |
内容类型 | 学位论文 |
源URL | [http://ir.qdio.ac.cn/handle/337002/178410] ![]() |
专题 | 海洋研究所_实验海洋生物学重点实验室 |
推荐引用方式 GB/T 7714 | 吴蒙. 牙鲆补体分子 C3 及大菱鲆 CD55 的功能与应用研究[D]. 中国科学院海洋研究所. 中国科学院大学. 2022. |
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