本发明涉及一种1,2,3,4,6‑O‑五没食子酰葡萄糖分子印迹整体柱的制备方法，该方法以1,2,3,4,6‑O‑五没食子酰葡萄糖为模板分子，以三元致孔剂N,N‑二甲基甲酰胺、二甲亚砜和1‑丁基‑3‑甲基四氟硼酸盐做溶剂，再加入功能单体、交联剂、金属离子、甲醚甲基丙烯酸酯低聚物以及引发剂，然后超声溶解并充氮气去除溶解氧，在水浴中进行聚合反应，最后得到具有选择性的1,2,3,4,6‑O‑五没食子酰葡萄糖分子印迹整体柱。本发明所述方法印迹因子大73.9，可用于固相萃取，实现对1,2,3,4,6‑O‑五没食子酰葡萄糖的特性选择性纯化。该印迹聚合物制备简单，且耐用性好，将其作为固相萃取的填料，为1,2,3,4,6‑O‑五没食子酰葡萄糖的分离纯化（纯度大于98%）提供了一种有效的方法。