题名 | 西太平洋卡罗琳海山区可培养脱氮细菌多样性及 4株海洋新菌的分类鉴定 |
作者 | 王倩 |
答辩日期 | 2020-05-18 |
文献子类 | 硕士 |
授予单位 | 中国科学院大学 |
授予地点 | 中国科学院海洋研究所 |
导师 | 张德超 |
关键词 | 卡罗琳海山 脱氮细菌多样性 新种 新属 多相分类法 |
学位名称 | 工程硕士 |
英文摘要 | 海山因其独特的地形构造和特殊的水文环境已经逐渐成为海洋生态系统的重要组成部分。海山为海洋微生物分布、进化和生态学的研究提供了一个理想的“天然实验室”,但是目前对海山区脱氮细菌多样性的研究还是比较有限。本论文通过涂布平板法和16S rRNA基因序列分析,对西太平洋卡罗琳海山区14个站位水体样品和1个生物样品(海绵)中可培养脱氮细菌多样性进行了初步研究。此外,采用多相分类的手段对4株潜在的海洋细菌新种进行分类鉴定。 从卡罗琳海山区14个站位水体样品分离到343株脱氮细菌,从1个生物样品(海绵)中分离到9株脱氮细菌,这些菌株隶属于3个门(变形菌门、放线菌门和拟杆菌门),38个属,62个种。其中变形菌门(Proteobacteria)331株,占分离总菌株的94%,分布在α-变形菌纲(138/331,42%)和γ-变形菌纲(193/331,58%)。根据海水样品采样深度不同,对不同生物区脱氮细菌分布分析,上层区(0 m≤水深≤200 m)162株、中层区(200 m<水深≤1000 m)125株、深海区(1000 m<水深≤4000 m)51株、深渊区(水深>4000 m)5株。其中盐单胞菌属(Halomonas)、拉布伦茨氏菌属(Labrenzia)和海旋菌属(Thalassospira)菌株在四个生物区都有分布,甚至可以在水深5603 m的环境中生存,表明这三个属菌株对海洋环境具有很强的适应性。 对4株海洋新细菌的分类鉴定结果如下: (1) TP462T菌株为海默氏菌属(Rheinheimera)的一个新种,属于革兰氏阴性(G-)菌,杆状,且端生鞭毛,具有运动性,生长温度范围为4-47℃,最适生长温度为25-30℃;生长盐浓度范围为0-4%(w/v)NaCl,最适盐度为2-3%。细胞主要脂肪酸为C17:1 ω8c、 summed feature 3(包括iso-C15:0 2-OH和/或C16:1 ω7c)和C16:0;极性脂包含磷脂酰甘油(Phosphatidylglycerol,PG)、磷脂酰乙醇胺(Phosphatidylethanolamine,PE)和两种未知的脂(Lipid,L1-2)。通过16S rRNA基因序列比对,与海默氏菌属已发表种Rheinheimera tangshanensis JA3-B52T相似度最高为96.8%,DNA G+C含量为48.7 mol%。命名为Rheinheimera marina。 (2) S1-10T菌株为栖海面菌属(Aequorivita)的一个新种,属于G-菌,杆状,没有运动性,兼性厌氧,氧化酶呈阴性,过氧化氢酶呈阳性,生长最适温度为30-35℃;最适pH为9.0;最适盐浓度为1%(w/v)NaCl。极性脂包含磷脂酰乙醇胺(Phosphatidylethanolamine,PE)、两种氨基磷脂(Aminolipid,AL1-2)、两种糖脂(Glycolipid,GL1-2)、一种磷酸糖脂(Phosphoglycolipid,PGL)和三种未知的极性脂(Lipid,L1-3);主要呼吸醌类型为甲基萘醌6(MK-6)。通过16S rRNA基因序列比对,与栖海面菌属已发表种Aequorivita viscosa 8-1bT相似度最高为97.7%,DNA G+C含量为34.6 mol%,与该属亲缘关系最近的菌株Aequorivita viscosa CGMCC 1.11023T的isDDH值和ANI值分别为15.4%和75.7%。命名为Aequorivita sinensis。此外,对Vitellibacter属的两个种V. todarodis和V. aquimaris的分类地位重新进行了厘定,将它们重新归为栖海面菌属,命名为Aequorivita todarodis和Aequorivita aquimaris。 (3) TP390T菌株是黄杆菌属(Flavobacterium)的一个新种,属于G-菌,杆状,兼性厌氧,滑动运动,生长最适温度为25℃,最适盐浓度为1%(w/v)NaCl,最适pH为6.0-7.0。细胞主要脂肪酸为iso-C15:0和iso-C15:1 G;主要呼吸醌类型为MK-6,极性脂包含一种糖脂(Glycolipid,GL)、磷脂酰乙醇胺(Phosphatidylethanolamine,PE)、四种未知的氨基磷脂(Aminolipid,AL1-4)和六种未知的极性脂(Lipid,L1-6)。通过16S rRNA基因序列比对,与黄杆菌属已发表种Flavobacterium jejuense EC11T相似度最高为97.8%,DNA G+C含量为31.2 mol%,与该属亲缘关系最近的菌株F. jejuense KCTC 42149T的isDDH和ANI值分别为22.60%和80.01%。命名为Flavobacterium profundi。 (4) TP-CH-4T菌株是黄杆菌科(Flavobacteriaceae)的一个新属,属于G-菌,不产孢子,没有运动性,严格好氧,在2216E培养基上菌落呈橘色。生长温度范围为4-37℃、盐浓度范围为1-4%(w/v)NaCl,并且生长需要海盐。细胞主要脂肪酸为iso-C15:0和summed feature 1(包括C13:0 3-OH和/或iso-C15:1 H);主要呼吸醌类型为MK-6。通过16S rRNA基因序列比对,与黄杆菌科假卓贝尔属模式种Pseudozobellia thermophila KMM 3531T相似度最高为95.1%,其次与鞭毛单胞属模式种Flagellimonas flava A11T菌株相似度为93.9%,DNA G+C含量为44.5 mol%。提出新属名为Pelagihabitans,该新属模式种命名为Pelagihabitans pacificus。 |
语种 | 中文 |
学科主题 | 生物工程(亦称生物技术) |
内容类型 | 学位论文 |
源URL | [http://ir.qdio.ac.cn/handle/337002/164688] |
专题 | 海洋研究所_海洋生物分类与系统演化实验室 |
推荐引用方式 GB/T 7714 | 王倩. 西太平洋卡罗琳海山区可培养脱氮细菌多样性及 4株海洋新菌的分类鉴定[D]. 中国科学院海洋研究所. 中国科学院大学. 2020. |
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