新型Hsp90抑制剂Y-632的抗肿瘤作用及机制研究

CORC > 上海药物研究所 > 中国科学院上海药物研究所 > 药理学第一研究室

	新型Hsp90抑制剂Y-632的抗肿瘤作用及机制研究
	王文倩; 全海天; 楼丽广
	2015-04-24
关键词	抑制剂复合物浮选药剂细胞内 Hsp90 Y-632 蛋白降解 GSH ATP 分子伴侣
页码	1
英文摘要	目的 Hsp90(Heat Shock Protein 90)是一类ATP依赖的分子伴侣,其广泛存在于细胞中,参与客户蛋白(Client Protein)的激活并促进其成熟。Hsp90的客户蛋白种类丰富,其中绝大多数都在肿瘤的发生发展中过度表达,因此,抑制Hsp90功能被视为一个良好的肿瘤治疗手段。目前存在的Hsp90抑制剂主要分为两大类。第一类为天然抑制剂,如格列霉素Geldanamycin(GA),但由于其较强的肝毒性,未能应用于临床;另一类为人工设计合成的小分子抑制剂,其具有易于合成、代谢稳定、给药方便等优点,且临床数据显示其相较于传统的Hsp90抑制剂具有更广阔的发展前景。然而,尽管Hsp90抑制剂已进入临床研究十数年,目前仍未有药物上市,因此,寻找一个与经典Hsp90抑制剂不同的新型小分子抑制剂十分必要。方法通过计算机辅助设计,化学合成,和药物高通量筛选,获得新型嘧啶类化合物Y-632。用Western blot法检测Y-632对Hsp90客户蛋白以及肿瘤细胞凋亡的作用;用SRB法检测Y-632抑制细胞增殖的能力;用孔雀绿比色法检测Y-632对Hsp90 ATP酶活性的作用;表面等离子共振SPR(Surface Plasmon Resonance)检测Y-632与Hsp90的结合能力;荧光素酶重折叠实验检测Y-632对Hsp90分子伴侣复合物的作用;用Western blot法检测含有巯基的还原剂DTT及GSH对Y-632诱导客户蛋白降解作用的影响;用MBB(monobromobimane)检测Y-632对细胞内巯基水平的作用。结果 Y-632能够诱导多种Hsp90客户蛋白如HER2、EGFR、Bcr-Ab1等的降解并引起Hsp70的代偿性升高。它对不同肿瘤细胞的增殖抑制作用相当,IC_(50)为2.7-11.1μM,并且可以诱导细胞凋亡。Y-632本身并不影响Hsp90ATP酶的活性,亦不与Hsp90分子结合,它主要通过抑制Hsp90分子伴侣复合物的活性最终影响Hsp90的活性。Y-632可显著降低细胞内巯基水平,还原剂DTT、GSH能够逆转Y-632对细胞巯基的作用以及Y-632对Hsp90分子伴侣复合物的抑制及Hsp90客户蛋白的降解。结论 Y-632通过降低细胞内巯基水平改变细胞的氧化还原状态,从而抑制Hsp90分子伴侣复合物的活性,诱导Hsp90客户蛋白降解,抑制细胞增殖,诱导凋亡发生。基于其新颖的结构特征,认为Y-632有望成为新型的Hsp90抑制剂进行进一步的研究开发。
会议录	2015医学前沿论坛暨第十四届全国肿瘤药理与化疗学术会议摘要汇编
文献子类	Article
语种	中文
内容类型	会议论文
源URL	[http://119.78.100.183/handle/2S10ELR8/267094]
专题	药理学第一研究室
作者单位	中国科学院上海药物研究所,药理学第一研究室,上海 201203, 中国.
推荐引用方式 GB/T 7714	王文倩,全海天,楼丽广. 新型Hsp90抑制剂Y-632的抗肿瘤作用及机制研究[C]. 见:.