JG3抑制Heparanase介导的细胞黏附及其机制研究

	JG3抑制Heparanase介导的细胞黏附及其机制研究
	李秋凝 ; 刘海婴 ; 潘秋明 ; 王路 2; 张靖 ; 陈勤 ; 王敬俭 ; 耿美玉1 ; 丁健1
	2009-04-09
关键词	细胞黏附整合素细胞运动介导 JG3 Heparanase
页码	1
英文摘要	目的:本实验室筛选得到的硫酸乙酰肝素酶抑制剂一褐藻寡糖JG3,在体内外均表现出明显的抑制肿瘤细胞运动的作用。基于硫酸乙酰肝素酶主要参与介导细胞的浸润行为,JG3单纯的靶向硫酸乙酰肝素酶的底物降解酶活作用不能完全解释其突出的抗肿瘤细胞运动的生物学特性,我们试图从细胞黏附抑制的角度,进一步阐释JG3抑制肿瘤细胞运动的机制。方法:(1)利用逆转录病毒感染的方法,建立稳定高表达硫酸乙酰肝素酶的CHO-K1细胞株;(2)利用结晶紫染色和免疫荧光技术观察高表达组和对照组在各种细胞外基质上的黏附状况,以及JG3对此的影响;(3)用流式细胞术检测JG3对整合素活化状态的影响;(4)利用western blot检测JG3对整合素介导的黏附信号转导的影响。结果:(1)我们成功建立的稳定高表达硫酸乙酰肝素酶的CHO-K1细胞株在fibronectin上表现出强于对照组的黏附能力;(2)JG3的加入并不能显著抑制高表达硫酸乙酰肝素酶的CHO-K1细胞株在fibronectin上的黏附效率,但免疫荧光的结果显示JG3有效抑制了该细胞株在fibronectin上黏着斑的形成;(3)流式细胞术和western blot的结果显示高表达硫酸乙酰肝素酶后的CHO-K1细胞中整合素β1的活化水平明显高于对照组,而JG3并不影响整合素β1的表达和活化水平;(4)JG3能显著抑制FAK蛋白861位点的磷酸化,以及ERK蛋白202/204两个位点的磷酸化;(5)JG3有效抑制了以Rac1为代表的小GTP酶的活性形式,为JG3抑制高表达硫酸乙酰肝素酶细胞的运动能力提供了一个可能的解释。结论:JG3不影响整合素介导的细胞黏附发生,而是通过抑制整合素介导的细胞黏附信号传导,尤其可能通过抑制FAK的磷酸化,抑制了细胞的运动能力。本研究为JG3对硫酸乙酰肝素酶高表达的恶性肿瘤细胞的运动抑制作用提供了一个可能的解释。
会议录	2009医学前沿论坛暨第十一届全国肿瘤药理与化疗学术会议论文集
文献子类	Article
语种	中文
内容类型	会议论文
源URL	[http://119.78.100.183/handle/2S10ELR8/267397]
专题	药物化学研究室药理学第一研究室
作者单位	1.中国科学院上海药物研究所,药理学第一研究室,上海 201203, 中国. 2.中国科学院上海药物研究所,药物化学研究室,上海 201203, 中国.;
推荐引用方式 GB/T 7714	李秋凝,刘海婴,潘秋明,等. JG3抑制Heparanase介导的细胞黏附及其机制研究[C]. 见:.