通过同源重组在聚球藻7002中表达小鼠金属硫蛋白-Ⅰ的初步研究

doi:10.3321/j.issn:1000-3282.2002.01.034

CORC > 北京大学 > 生命科学学院

	通过同源重组在聚球藻7002中表达小鼠金属硫蛋白-Ⅰ的初步研究; Expression of Mouse Metallothionein-Ⅰ Gene in Synechococcus sp. PCC 7002 by Homologous Recombination
	周杰 ; 罗娜 ; 宁叶 ; 施定基 ; 俞梅敏 ; 茹炳根
刊名	生物化学与生物物理进展
	2002
关键词	小鼠金属硫蛋白-Ⅰ 启动子Pcpcβ glnA整合平台聚球藻7002 同源重组 mouse metallothionein-I promoter Pcpc beta glnA integrative platform Synechococcus sp PCC 7002 homologous recombination
DOI	10.3321/j.issn:1000-3282.2002.01.034
英文摘要	用PCR方法从海洋单细胞蓝藻聚球藻7002(Synechococcus sp. PCC 7002)基因组DNA中扩增得到藻蓝蛋白β亚基基因(cpcβ)的上游序列(Pcpcβ),及编码谷氨酰胺合成酶的glnA基因片段.以Pcpcβ作为启动子、以glnA基因片段作为整合平台,构建含有小鼠金属硫蛋白-Ⅰ(mMT-Ⅰ)cDNA的同源整合表达载体pKGC-MT.通过自然转化法将整合表达载体导入聚球藻7002中,经氨苄青霉素筛选,得到遗传性状稳定的转基因藻.PCR检测证明mMT-Ⅰ基因已整合到蓝藻基因组DNA上;蛋白质印迹表明mMT-Ⅰ已在蓝藻中表达;ELISA结果显示mMT-Ⅰ在蓝藻中的表达量约为800 μg/g.; The 300 bp upstream fragment of cpcbeta gene which encodes the beta-subunit of phycocyanin and the 1.4 kb fragment of glnA gene encoding glutamine synthetase were obtained by polymerase chain reaction (PCR) from genomic DNA of marine cyanobacterium Synechococcus sp. PCC 7002. Then, integrative expression vector pKGC-MT, which contained promoter Pcpcbeta, mMT-I gene and integrative platform glnA, was constructed and introduced into Synechococcus sp. PCC 7002 via natural transformation. Selected by ampicillin, the stable transgenic cyanobacterium was obtained. PCR analysis indicated the integration of mMT-I gene in genomic DNA of Synechoccus sp. PCC 7002 and Western blotting demonstrated the expression of mMT-I in the cyanobacterium. According to the result of ELISA, the amount of the expressed MMT-I was about 800 mug/g fresh cells.; 国家科技攻关项目; http://gateway.webofknowledge.com/gateway/Gateway.cgi?GWVersion=2&SrcApp=PARTNER_APP&SrcAuth=LinksAMR&KeyUT=WOS:000174144100034&DestLinkType=FullRecord&DestApp=ALL_WOS&UsrCustomerID=8e1609b174ce4e31116a60747a720701 ; SCI(E); 中文核心期刊要目总览(PKU); 中国科技核心期刊(ISTIC); 中国科学引文数据库(CSCD); 1; 1; 149-153; 29
语种	中文
内容类型	期刊论文
源URL	[http://ir.pku.edu.cn/handle/20.500.11897/45880]
专题	生命科学学院
推荐引用方式 GB/T 7714	周杰,罗娜,宁叶,等. 通过同源重组在聚球藻7002中表达小鼠金属硫蛋白-Ⅰ的初步研究, Expression of Mouse Metallothionein-Ⅰ Gene in Synechococcus sp. PCC 7002 by Homologous Recombination[J]. 生物化学与生物物理进展,2002.
APA	周杰,罗娜,宁叶,施定基,俞梅敏,&茹炳根.(2002).通过同源重组在聚球藻7002中表达小鼠金属硫蛋白-Ⅰ的初步研究.生物化学与生物物理进展.
MLA	周杰,et al."通过同源重组在聚球藻7002中表达小鼠金属硫蛋白-Ⅰ的初步研究".生物化学与生物物理进展 (2002).