| 题名 | 鲤T细胞标志基因的克隆及表达分析 |
| 作者 | 尚娜 |
| 学位类别 | 硕士 |
| 答辩日期 | 2009-05-25 |
| 授予单位 | 中国科学院水生生物研究所 |
| 授予地点 | 水生生物研究所 |
| 导师 | 郭琼林 |
| 关键词 | T细胞标志基因 鲤 原位杂交 病毒感染 寄生虫感染 荧光定量分析 |
| 其他题名 | Cloning and expression analysis of several T cell marker genes of carp |
| 中文摘要 | 鱼类T淋巴细胞标志基因是鱼类免疫学研究中一个备受关注的问题。通过同源克隆与RACE相结合的方法，获得了鲤（Cyprinus carpio L.）CD8α基因的全长cDNA序列。根据本实验室已获得的CD3γ/δ、CD4L-1、CD8α和CD8β的基因序列设计反义RNA探针，应用原位杂交技术检测了CD3γ/δ、CD8α、CD8β和CD4L-1表达细胞在鲤胸腺、头肾、体肾和脾脏中的分布特征。CD3γ/δ、CD8α、CD8β和CD4L-1表达细胞在鲤胸腺的淋巴样外区呈点状密集分布，而在上皮样内区分布较少且分散；在头肾、体肾和脾脏组织中分散分布，在血管周围呈现不同程度的聚集分布。 通过同源克隆与RACE相结合的方法，获得鲤T-bet、GATA-3、HCK和LCK基因的全长cDNA序列；通过反向PCR的方法，获得鲤T-bet和GATA-3基因的启动子序列。 RT-PCR分析显示在6、18月龄鲤相关组织中均检测到TCRγ、CD3γ/δ、LCK和HCK基因的转录产物，其中以胸腺、鳃和脾脏表达较强；在18月龄鲤相关组织中均检测到T-bet和GATA-3基因的转录产物，其中以胸腺和脾脏表达较强。T-bet、GATA-3和HCK基因主要在转GH基因鲤胸腺、脾脏和头肾组织上调表达，而LCK和CD8α基因主要在转GH基因鲤胸腺组织上调表达，进一步表明转GH基因对鲤T细胞发育的促进作用。 通过RQ-PCR检测，发现在鲤春病毒（SVCV）感染条件下，LCK、HCK、T-bet、GATA-3和CD8α基因在鲤胸腺、头肾、脾脏、鳃、肠和皮肤中呈现动态表达变化。其中在胸腺以表达下降为主，头肾和脾脏在感染早期以上调表达为主；在3-7天，鳃和肠以上调表达为主；表明T细胞系统在鱼类抗病毒免疫中发挥非常活跃的作用。而在小瓜虫（Ichthyophthirius multifiliis）感染条件下，LCK、HCK、T-bet、GATA-3和CD8α基因在1-3天鲤胸腺和头肾以上调表达为主；HCK、GATA-3基因在3-4天皮肤以上调表达为主；提示T细胞系统与鱼类抗寄生虫免疫密切相关。 |
| 语种 | 中文 |
| 公开日期 | 2010-11-16 |
| 页码 | 104 |
| 内容类型 | 学位论文 |
| 源URL | [http://ir.ihb.ac.cn/handle/342005/12470]  |
| 专题 | 水生生物研究所_中科院水生所知识产出（2009年前）_学位论文 |
| 推荐引用方式 GB/T 7714 | 尚娜. 鲤T细胞标志基因的克隆及表达分析[D]. 水生生物研究所. 中国科学院水生生物研究所. 2009. |
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