苏云金芽孢杆菌cry2Aa基因的克隆、表达与活性 | |
李海涛1; 姚江1; 郭巍1; 宋福平1; 高继国2; 黄大昉3; 张杰1 | |
刊名 | 农业生物技术学报 |
2005 | |
卷号 | 13期号:6页码:787-791 |
关键词 | 苏云金芽孢杆菌 cry2Aa基因 克隆 表达 杀虫活性 |
ISSN号 | 1006-1304 |
其他题名 | Cloning and Expression of cry2Aa Genes from Isolates of Bacillus thuringiensis and Their Bioactivity |
英文摘要 | B-8-G和Ly30是我国自行分离的对多种重要农业害虫具有高毒力的苏云金芽孢杆菌(Bacillus thuringiensis)菌株,经PCR-RFLP鉴定均含有cry2Aa基因.根据cry2Aa全长基因序列设计特异引物,以B-8-G总DNA为模板扩增其中的cry2Aa全长基因,与大肠杆菌(Escherichia coli)表达载体pET-21b相连接,获得含有cry2Aa全长基因的重组质粒pET2Aa,该基因在大肠杆菌BL21菌株能够正常表达65 kD蛋白.通过构建Ly30总DNA文库方法从中筛选获得cry2Aa基因,将其连接至Bt-E.coli穿梭表达载体pHT315上,转化Bt无晶体突变株HD-73中,该基因能正常表达65 kD蛋白,并形成立方体状晶体.这两种基因序列已被国际Bt基因命名委员会分别正式命名为cry2Aa9和cry2Aa10.杀虫生物活性测定结果表明cry2Aa基因表达产物对黄胫小车蝗(Oedaleusinfernlis)、尖音库蚊(Culex pipiens)、黑翅伊蚊(Aedes melanopterus)、水稻二化螟(Chilo suppressalis)和小菜蛾(Plutellaxylostella)幼虫均具有显著的毒杀作用.首次报道cry2Aa10基因表达蛋白对蝗虫、库蚊具有杀虫活性.这些基因的获得,将为高效工程菌和抗虫转基因植物的研制提供了新的基因资源. |
学科主题 | 生物化学 ; 植物保护 |
语种 | 中文 |
内容类型 | 期刊论文 |
源URL | [http://ir.nais.net.cn/handle/2HMLN22E/137800] |
专题 | 植物保护研究所 |
作者单位 | 1.中国农业科学院植物保护研究所, 植物病虫害生物学国家重点实验室, 北京, 100094; 2.东北农业大学生命科学学院, 黑龙江, 哈尔滨, 150030; 3.中国农业科学院生物技术研究所, 北京, 100081 |
推荐引用方式 GB/T 7714 | 李海涛,姚江,郭巍,等. 苏云金芽孢杆菌cry2Aa基因的克隆、表达与活性[J]. 农业生物技术学报,2005,13(6):787-791. |
APA | 李海涛.,姚江.,郭巍.,宋福平.,高继国.,...&张杰.(2005).苏云金芽孢杆菌cry2Aa基因的克隆、表达与活性.农业生物技术学报,13(6),787-791. |
MLA | 李海涛,et al."苏云金芽孢杆菌cry2Aa基因的克隆、表达与活性".农业生物技术学报 13.6(2005):787-791. |
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