棕点湍蛙皮肤分泌液中促胰岛素释放肽的分离纯化、基因克隆及活性分析

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	棕点湍蛙皮肤分泌液中促胰岛素释放肽的分离纯化、基因克隆及活性分析
	冯浩 1; 李宗杰 2; 吕毅 1; 王美娟 1; 李建许[*]3
刊名	动物学研究
	2009
卷号	30 期号:2 页码:165−170
关键词	棕点湍蛙皮肤分泌液促胰岛素释放肽胰岛素分泌
其他题名	Isolation and Molecular Cloning of Insulinotropic Peptide from the Skin Secretions of Amolops loloensis and the Study of Its Bioactivities
通讯作者	jxauyhl@yahoo.com.cn
合作状况	其它
中文摘要	通过分离纯化棕点湍蛙(Amolops loloensis)皮肤分泌液中的生物活性物质,得到有促胰岛素释放活性的分离峰,并鉴定其结构.采用葡聚糖Sephadex G-50凝胶层析和反相高效液相(RP-HPLC)等手段对棕点湍蛙皮肤分泌液进行分离纯化,利用胰岛素释放实验进行活性检测,Edman降解法测定活性峰的氨基酸序列,反转录法构建cDNA文库并克隆其基因.得到一个具有显著的促胰岛素释放活性的十六肽,测得其氨基酸序列为:FMPIvGKsMSGLSGKL-NH2,命名为amolopin-1.由cDNA(开放阅读框为192bp)推导的氨基酸一级结构显示,其前体由64个氨基酸残基(aa)组成,包括高度保守的信号肽(22aa),酸性肽以及成熟肽.经过数据库序列比对,从棕点湍蛙皮肤中得到一个新的促胰岛素释放肽,进一步分析其作用机理和药代动力学,极有可能得到一个新的治疗糖尿病的降糖药物.
英文摘要	To investigate the bioactive component from the skin secretion ofAmolops loloensis, isolated peaks with insulin-releasing activity were purified and structurally determined. Skin secretions were isolated by Gel filtration and Reversed phase high-performance liquid chromatography, and tested with insulin-releasing assay. The amino acid sequence of bioactive peak was determined by Edman degradation and identified by gene clone method. A 16-amino peptide with obvious insulin-releasing activity was obtained and sequenced as FMPIVGKSMSGLSGKL-NH2, which was designated amolopin-1. The precursor peptide composed of 64 amino acid residues deduced from cloned skin cDNA （open reading frame 192bp） exhibited a highly-conserved signal peptide （22aa）, an acidic amino acid residue-rich domain and an amolopin-1 encoding domain. Structural alignment with database records revealed that a novel insulinotropic peptide was obtained from skin secretion of Amolops loloensis therefore further study of its acting mechanism and pharmacokinetics may lead to the discovery of a new treatment for diabetes.
收录类别	其他
资助信息	云南省重点项目资助(2006C0011Z).
语种	中文
公开日期	2010-08-04
内容类型	期刊论文
源URL	[http://159.226.149.42:8088/handle/152453/874]
专题	昆明动物研究所_动物毒素室昆明动物研究所_动物模型与人类重大疾病机理重点实验室
作者单位	1.南京农业大学生命科学学院农业部农业环境微生物工程重点开放实验室，江苏南京 210095 2.上海应用技术学院，上海200235 3.中国科学院昆明动物研究所动物模型和人类疾病机理重点实验室，云南昆明650223
推荐引用方式 GB/T 7714	冯浩,李宗杰,吕毅,等. 棕点湍蛙皮肤分泌液中促胰岛素释放肽的分离纯化、基因克隆及活性分析[J]. 动物学研究,2009,30(2):165−170.
APA	冯浩,李宗杰,吕毅,王美娟,&李建许[*].(2009).棕点湍蛙皮肤分泌液中促胰岛素释放肽的分离纯化、基因克隆及活性分析.动物学研究,30(2),165−170.
MLA	冯浩,et al."棕点湍蛙皮肤分泌液中促胰岛素释放肽的分离纯化、基因克隆及活性分析".动物学研究 30.2(2009):165−170.