| 题名 | 全内反射荧光成像下的单粒子追踪研究 |
| 作者 | 余琴 |
| 学位类别 | 硕士 |
| 答辩日期 | 2000 |
| 授予单位 | 中国科学院上海光学精密机械研究所 |
| 导师 | 刘力 |
| 关键词 | 单粒子追踪 全内反射荧光成像 单分子探测 精确定位 活细胞 荧光共振能量转移 蛋白质间相互作用 |
| 中文摘要 | 单粒子追踪（Single Particle Tracking, SPT）技术基于先进的光学显微术和荧光标记方法，通过分析单分子、单粒子在细胞内的运动扩散信息，来研究蛋白质功能和相互作用及细胞膜的微观结构域。 本论文分两部分，第一部分为全内反射荧光成像技术中单粒子追踪技术的研究，并进行了活细胞内单分子的探测。 第二部分利用FRET荧光光谱技术FRET荧光光谱研究了Dok1蛋白分子间的相互作用。创新点如下： 1.对实验室自建的物镜型全内反射荧光成像系统的分辨率，系统的探测效率进行了实验测量，并确定了被探测的光子数和CCD的count数之间的数量对应关系。系统标定结果：系统最高分辨率为200nm；最高时间分辨率为ms量级；在绿光波段的荧光信号探测效率可达4％；系统探测灵敏度可达～200个光子。 2. 以单个纳米荧光小球 (40nm)在甘油-水混合溶液 ( ) 中的运动模拟纳米荧光小球在活细胞胞浆液体环境中的运动进行了溶液中单个纳米荧光小球的成像和追踪实验。 3.实现了CHO活细胞内单个EGFR蛋白分子的动力学观测，为进一步研究EGFR在细胞膜表面的扩散行为，揭示其二聚化机制打下了基础。 4.建立了一套FRET荧光光谱测量装置，验证了接头蛋白分子Dok1的同源寡聚化作用。 |
| 语种 | 中文 |
| 内容类型 | 学位论文 |
| 源URL | [http://ir.siom.ac.cn/handle/181231/16535]  |
| 专题 | 上海光学精密机械研究所_学位论文 |
| 推荐引用方式 GB/T 7714 | 余琴. 全内反射荧光成像下的单粒子追踪研究[D]. 中国科学院上海光学精密机械研究所. 2000. |
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